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大肠杆菌感受态细胞的转化率如何计算
点击次数:102      发布时间:2019-07-18
 大肠杆菌感受态细胞的转化率如何计算
  大肠杆菌感受态细胞JM109取高质量DNA的理想菌株,可用于构建克隆,蓝白斑筛选实验。大肠杆菌是构建普通质粒、病毒载体和各种文库的重要工具,在基础科学和工业生产中发挥重要的作用。
  细胞能够从周围环境中摄取DNA分子,并且不易被细胞内的限制性核酸内切酶分解时所处的一种特殊生理状态称感受态,例如野生型大肠杆菌并不容易转化,这是由于DNA无法进入野生型大肠杆菌的细胞。经过多年的努力,科学家们发现了一种方法可以增加细胞吸收外源DNA的效率。那就是用化学方法处理细胞,使其改变膜对DNA的通透性。这种细胞就称为感受态细胞,即细胞处于能摄入核酸分子时的生理状态。这种方法已经成为基因工程的常规技术,它对于我们利用体外DNA重组技术来了解真核和原核生物的基因功能特别重要。
  大肠杆菌感受态细胞上海淳麦生物科技有限公司在感受态细胞的研发方面,实力雄厚,拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类,共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面,拥有了大肠杆菌电转化感受态细胞和农杆菌电击感受态种类,极大提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。
大肠杆菌感受态细胞
  大肠杆菌感受态细胞计算转化率
  统计每个培养皿中的菌落数。
  转化后在含抗生素的平板上长出的菌落即为转化子,根据此培养皿中的菌落数可计算出转化子总数和转化频率,公式如下:
  转化子总数=菌落数×稀释倍数×转化反应原液总体积/涂板菌液体积
  感受态细胞总数=对照组2菌落数×稀释倍数×菌液总体积/涂板菌液体积
  感受态细胞转化效率=转化子总数/感受态细胞总数
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